Apraksts
Restrikcijas enzīmi ir fermenti, kas spēj šķelt vai griezt DNS molekulas ļoti specifiskās vietās, pamatojoties uz DNS molekulas bāzu secību; to atklāšana un izolēšana 20. gadsimta otrajā pusē sniedza pētniekiem nenovērtējamu rīku un ātri paplašināja molekulārās bioloģijas jomu. Agarozes elektroforēze ir tehnika, kas ļauj atdalīt DNS fragmentus, kas rodas, izmantojot restrikcijas enzīmus. Šajā aktivitātē studenti veiks agarozes elektroforēzi ar trim DNS paraugiem, kas jau ir apstrādāti ar restrikcijas enzīmiem. Viens paraugs ir griezts ar enzīmu HindIII, viens ar enzīmu EcoRI, un viens ar abiem enzīmiem. Rezultātā iegūtais DNS joslu raksts uz agarozes gela parādīs, ka katrs enzīms ietekmē DNS atšķirīgi. Studenti ne tikai apgūs DNS elektroforēzes procesu, bet arī iemācīsies tehnikas, kas saistītas ar šo procesu, piemēram, agarozes gela sagatavošanu, DNS paraugu ievadīšanu agarozes gelā un gela krāsošanu, lai vizualizētu DNS joslas. Viņi arī iemācīsies noteikt nezināmu DNS fragmentu izmērus, analizējot savus rezultātus. Komplektā ietilpst īpaši apstrādāti DNS paraugi, kuriem nav nepieciešama dzesēšana vai sasaldēšana, sagatavota agarozes želeja, kuru var viegli izkausēt ūdens vannā vai mikroviļņu krāsnī, TBE elektroforēzes buferis un DNS krāsa. Komplektā ir pietiekami daudz DNS, lai veiktu 10 gelu analīzes. Komplektā ietilpst:
- 200 mL sagatavota agarozes, 0,8% šķīduma
- 500 mL Tris Borate ETA bufera, 5X
- 60 mL DNS krāsas, 20X
- 100 µL Lambda DNS/EcoRI šķelšanas ar ielādes krāsu
- 100 µL Lambda DNS/HindIII šķelšanas ar ielādes krāsu
- 100 µL Lambda DNS/EcoRI, HindIII šķelšanas ar ielādes krāsu
Nepieciešams, bet nav iekļauts: agarozes elektroforēzes kamera, strāvas avoti un mikropipetes, kas spēj mērīt 10 µL.
Elektroforēze un DNS fragmentu garuma noteikšanas laboratorijas aktivitāte
€369 Bez PVN (€446.49 ar pvn)
€ + papildaprīkojums
