Beskrivning

Restriktionsenzymer är enzymer som kan klyva eller skära DNA-molekyler på mycket specifika platser baserat på DNA-molekylens sekvens av baser. Deras upptäckt och isolering under andra hälften av 1900-talet gav forskare ett ovärderligt verktyg och expanderade snabbt inom molekylärbiologins område. Agaroselektrofores är en teknik för att separera DNA-bitar som uppstår vid användning av restriktionsenzymer. I denna aktivitet kommer studenter att utföra agaroselektrofores på tre DNA-prover som redan har behandlats med restriktionsenzymer. Ett prov har skurits med enzymet HindIII, ett har skurits med enzymet EcoRI, och ett har skurits med båda enzymerna. Det resulterande mönstret av DNA-band på agarosegelen kommer att visa att varje enzym påverkar DNA:t olika. Studenterna kommer inte bara att lära sig om processen för DNA-elektrofores utan också lära sig teknikerna som är förknippade med processen, såsom att sätta upp en agarosegel, ladda DNA-prover i agarosegelen och färga gelen för att visualisera DNA-banden. De kommer också att lära sig hur man bestämmer storlekarna på okända DNA-fragment efter att ha undersökt sina resultat. Kitet innehåller speciellt behandlade DNA-prover som inte kräver kylning eller frysning, förberedd agaros som enkelt kan smältas i ett vattenbad eller mikrovågsugn, TBE-elektroforesbuffert och DNA-färg. Det finns tillräckligt med DNA för att köra 10 geler. Kit Innehåller:

• 200mL Förberedd Agarose, 0,8% Lösning
• 500mL Tris Borate ETA Buffert, 5X
• 60mL DNA Färg, 20X
• 100 µL Lambda DNA/EcoRI Digest med Laddningsfärg
• 100 µL Lambda DNA/HindIII Digest med Laddningsfärg
• 100 µL Lambda DNA/EcoRI,HindIII Digest med Laddningsfärg

Behövs men ingår inte är agaroselektroforeskammare, strömförsörjningar och mikropipetter som kan mäta 10µL.